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Réaction en chaîne par polymérase - PCR



PCR: technique génétique importante

Qu'est-ce que (définition)

La technique de PCR est basée sur l'amplification - in vitro - d'une seule séquence d'ADN des millions de fois.

Fondamentalement, elle fait plusieurs copies du fragment d'ADN d'intérêt qui sera étudié.

Exemple

Si nous ne regardions que l'ADN extrait d'une cellule, il serait extrêmement difficile de trouver un fragment d'intérêt; En d'autres termes, il serait presque impossible d'identifier cette partie particulière de l'ADN.

Autrement dit, vous pouvez affirmer que grâce à la technique de PCR, il est possible de "fredonner" et de ne voir que la partie qui compte.

Les applications

Les applications de la technique PCR sont nombreuses et dans les domaines les plus différents. Voici quelques exemples:

- Diagnostic des maladies infectieuses et génétiques;

- Détermination de la variabilité génétique;

- Sexage d'embryons;

- Etude de l'expression des gènes;

- enquête médico-légale;

- Détermination de la lignée animale;

- Identification des pathogènes, paternité, etc.

Comment ça se passe

La PCR se déroule en trois étapes et toutes dépendent d'un gradient de température.

Étape 1: dénaturation (à 95 ° C) du double brin d'ADN, qui se produit en raison de l'augmentation de la température.

Étape 2: Amorçage (57ºC à 63ºC) des amorces, qui peut se produire dans une plage de température comprise entre 57ºC et 63ºC.

Étape 3: Extension (à 72 ° C) avec l'opération de Taq Polymerase, qui aide à l'introduction de nucléotides qui complèteront la chaîne en cours de synthèse.

Conclusion

Une PCR normale comporte environ 36 cycles, dont chacun englobe les trois étapes décrites ci-dessus. Et à chaque cycle, il y a la multiplication ou l'amplification exponentielle de la quantité de molécules d'ADN.

Par exemple, si dans le premier cycle nous commençons la PCR avec une seule molécule d'ADN, nous aurons finalement deux molécules. À la fin du deuxième cycle, nous en aurons quatre. A la fin du troisième nous aurons huit molécules et donc exponentiellement.

À la fin des 36 cycles, nous aurons des milliards de copies de l'ADN qui peuvent être analysées en laboratoire. Cette analyse se fera à l'aide de Électrophorèse.